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10-30 2023

知識(shí)梳理||Western Blotting實(shí)驗(yàn)中常見問題及解決方案

發(fā)布者:本網(wǎng)站 瀏覽次數(shù):1003

HvBo  Gene


WesternBlotting作為生物學(xué)中最常用到的實(shí)驗(yàn)方法,雖然基本所有生物學(xué)子都會(huì),但想要得到一張干凈漂亮的結(jié)果也并不容易,會(huì)遇到各種各樣的狀況。今天小編來向大家介紹一些WB結(jié)果圖片中常見的問題及相應(yīng)的解決方案,希望能為大家提供幫助。




問題1:印跡中的氣泡





癥結(jié):轉(zhuǎn)移“三明治”組裝不恰當(dāng)

解決:1、在組裝轉(zhuǎn)移“三明治”的時(shí)候使用更多的轉(zhuǎn)印緩沖液;

2、確保在組裝“三明治”的時(shí)候移除凝膠和印跡膜之間所有的氣泡;

3、在抗體孵育前用麗春紅S為印跡膜染色,以檢查轉(zhuǎn)移質(zhì)量。








問題2:過度轉(zhuǎn)印











問題3:轉(zhuǎn)印不足











問題4:轉(zhuǎn)印不均勻











問題5:印跡背景過強(qiáng)











問題6:印跡背景有污跡











問題7:印跡背景有斑點(diǎn)











問題8:非特異條帶











問題9:檢測(cè)信號(hào)弱或無信號(hào)








結(jié)語


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